生態環境監測機構資質認定補充 要求中規定，初次使用標準方法前，應進行方法驗證。包括對方法涉及的人員培訓和技術能力、設施和環境條件、采樣及分析儀器設備、試劑材料、標準物質、原始記錄和監測報告格式、方法性能指標（如校準曲線、檢出限、測定下限、準確度、精密度）等內容進行驗證，并根據標準的適用范圍，選取不少于一種實際樣品進行測定；方法驗證的過程及結果應形成報告，并附驗證全過程的原始記錄，保證過程可追溯。

 

1.吃透標準

 

（1）看清標準的適用范圍

 

該方法可以檢測哪些介質樣品，例如，地表水、地下水、廢水等。

 

（2）理解透徹標準的方法原理

 

看懂基本的理論知識，待測物質與某種試劑的反應或者是通過什么樣的方法檢測出待測物質等等。

 

（3）注意該方法存在的干擾及消除干擾的方法

 

哪些因素會干擾測定結果，用什么方法可以消除或降低干擾。

 

（4）做實驗前需要準備的物資

 

方法中寫明了用什么試劑/耗材、儀器設備，他們的型號、規格級別與及一些特殊規定是什么都要關注。

 

（5）樣品采集要點

 

采樣人員要關注，樣品采集運輸和保存，是否需要添加固定劑，是否需要什么特殊的保存條件等等。

 

（6）弄懂樣品分析、結果計算

 

分析結束后關注儀器條件、前處理步驟、分析檢測，公式運算、結果表示

 

（7）該檢測項目的精密度、準確度范圍

 

要留意標準方法編制組的數據，作為本實驗室方法驗證時的判別依據

 

（8）質量保證與質量控制

 

室內質控要求和注意事項。

 

 

（1）成立方法驗證團隊

 

在開始前應組織方法驗證的團隊，包括技術骨干、有經驗者、采樣人員、檢測分析人員、質控人員，團隊應分工合作，每個人的職責都需要明確。

 

（2）評估團隊工作量

 

做方法驗證不能追求快，也不能應付了事，應切實、認真對待，每個團隊承擔多少個方法驗證？預留足夠時間，避免承擔過多，不可時間倉促。

 

（3）前期準備

 

團隊建立后，不能立馬開展驗證，先組織學習標準，包括采樣、檢測分析、質控要點；然后盤點所需物資設備等。

 

（4）實施驗證

 

在做方法驗證過程中，不可忽略現場采樣環節，按照HJ168的要求以及對應標準方法的要求開展，全面驗證，對方法進行驗證，并完成全過程記錄。

 

通常用重復n次的空白試驗測得值的標準偏差表示。

 

空白試驗：用實驗室用水代替樣品，其他所加試劑操作步驟均與樣品測定完全相同的操作過程。

 

影響空白值的因素：實驗室用水的質量、試劑（包括固定劑）中的雜質，器皿、環境及操作引入的沾污。

 

以上各種因素大小會變化

 

注意：是制備n個空白試驗樣品，不是用1個空白樣品連續測試n次，n=？

 

最后計算的檢出限小于或等于檢測方法中檢出限值，才算合格。但是實驗室檢出限不是越低越好。

 

（1）校準曲線的繪制

 

一定要按照檢測方法中的濃度系列嗎？校準曲線為樣品服務。

 

最佳定量范圍：測定下限以上，即4倍檢出限以上，到測定上限之間，跨度不宜過大。

 

（2）精密度的驗證方式

 

a.有證標準物質：高（測定上限90%附近）、中（校準曲線中間濃度點）、低（測定下限附近）3個不同濃度水平，低濃度要在測定下限附近，評判標準依據有證標物證書參考值，按全程序每個樣品測定6次

 

b.實際樣品：1-3個不同含量水平，按全程序每個樣品測定6次，評判標準參考檢測方法中的要求，實際樣品要有檢出.

 

 

（1）正確度的驗證方式

 

a.標準物質/標準樣品：高中低3個不同濃度，分別測定6次，計算相對誤差均值以及變動范圍。

 

b.加標回收：1-3個不同濃度的實際樣品，分別加入一定量的有證標物，分別平行測定6次，計算加標回收率均值及變動范圍

 

（2）判定標準

 

標準物質的評判標準依據有證標物證書參考值；加標回收數據評判標準參照檢測方法中要求。

 

 

實驗室做方法驗證的目的是對方法運用上的摸索和磨合，盡可能的進行最全面的驗證，千萬不能想著哪些環節和工作可以不做。完成了方法驗證，只能說明會做了，距離能做、懂做、做得好，還隔著幾百個實際樣品。

 

（1）方法驗證材料里沒有采樣采集、運輸保存等記錄

 

（2）沒有嚴格按照檢測方法的步驟進行，對凈化濃縮等步驟直接忽略

 

（3）當檢測方法中包含兩種方法時，只完成其中一項的驗證（例如，《水質硝基苯類化合物的測定液液萃取/固相萃取—氣相色譜法》（HJ648））

 

（4）當檢測方法的適用范圍存在多種類型時，只完成其中一種的驗證（例如，環境空氣/污染源廢氣等）